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2 材料与设施Materials and Methods

2.1 试剂Chemicals

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所有的溶剂与试剂均为色谱级，维生素A，维生素D3，维生素E尺度品购于xxx

All chemicals and solvent were HPLC. Standard: vitamin A, vitamin D3, vitamin E and were purchased from xxx.

2.2 样品贬责Sample Preparation

1) 将样品摇匀，称取2.0g掌握的样品；

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2) 2.0g样品中加入30 mL无水酒精，10 mL 10 g/L xxx溶液，10 mL 50 g/L氢氧化钠，搀杂均匀；

3) 70℃恒温回荡水浴30 min，阻难样品粘附在瓶壁上；

4) 用水冲淋烧瓶使其冷却至40℃掌握；

5) 将样品溶液震荡至250 mL分液漏斗中，用60 mL xxx分3次洗涤烧瓶，并将洗涤液也转入分液漏斗中，使终末溶液中的醇水比大于1:2；

6) 回荡混匀后，加入50 mL石油醚，加盖，放气，搀杂，强烈回荡2 min，静置分层；

7) 震荡水相于分液漏斗，分2次用50 mL石油醚重叠索要3次，弃去水相，并吞石油醚；

8) 并吞的石油醚用石油醚弥散的水洗涤3次，每次50 mL，酚酞覆按流出物为中性，防护初度水洗时轻轻旋摇，阻难乳化；

9) 将洗涤后的石油醚索要液通过无水硫酸钠脱水，震荡至250 mL棕色容量瓶中，加入100 mg xxx，混匀，用石油醚定容至刻度；

10) 50℃水浴旋转挥发近干，氮气吹干；

11) 残留物用1 mL酒精融化，并以0.45 µm滤膜过滤，进样20 µL。

注：索要的所有这个词流程均需在避光透风橱中进行。

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2.3 HPLC分析HPLC Analysis

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本践诺所用的仪器为Waters高效液相色谱仪，配备二极管阵列检测器。

色谱柱为xxx C18 (150 mm*4.6 mm, 5 μm)，流动相为甲醇-xxx，流速为1.0 mL/min。

3 成果Results

色谱图Chromatogram

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